無菌實驗室凈化

無菌室在微生物實驗室中比較常見，無菌室包含準備區、緩沖區、無菌室，建造標準需要符合中華人民共和國衛生行業標準:WS233-2002《微生物和生物醫學實驗室生物安全通用準則》。二級（P2）無菌室為萬級、局部百級，包含高、中、初效過濾系統，無菌室的大小，應按每個操作人員占用面積不少于3m2設置，符合目前世界通用的美國聯邦209E標準。更衣間及風淋室采用人體自動感應系統。

雙佳凈化做為專業的實驗室裝修建造商，為您介紹無菌實驗室的基本要求：

(1)在分隔內間和外間的墻壁或者“隔扇”上，應開一個小窗，用作接種過程中必要的內外傳遞物品的通道，以便減少人員進出內間的次數，降低污染程度。小窗寬60cm、高40cm、厚30cm，內外都應掛對拉的窗扇。

(2)無菌實驗室容積小而嚴密，使用一段時間后，室內溫度很高，故應設置通氣窗。通氣窗應該設在內室進門處的頂棚上(即距離工作臺最遠的位置)，最好為雙?層結構，外層為百葉窗，內層可用抽板式的窗扇。通氣窗可以在內室使用后、滅菌前開啟，以流通空氣。有條件的可以安裝恒溫恒濕機。

(3)無菌實驗室應有內、外兩間，內間是無菌室，外間是緩沖室。房間的容積不宜過大，以便于空氣滅菌。最小內間面積2×2.5=5㎡，外間面積1×2=2㎡，高以2.5m以下為宜，都應有天花板。

(4)內間應當設拉門，以便減少空氣的波動，門應該設在離工作臺最遠的位置上;外間的門最好也采用拉門，要設在距離內間最遠的位置上

無菌檢測實驗室建造-實驗室裝修凈化設計

雙佳凈化作為專業的實驗室建造裝修工程商，為您介紹無菌實驗室的管理要求：

2.?工作人員進入無菌室前，必須用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在緩沖間更換專用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用70%的乙醇再次擦拭雙手)，方可進入無菌室進行操作。

3.?無菌室使用前必須打開無菌室的紫外燈輻照滅菌30分鐘以上，并且同時打開超凈臺進行吹風。操作人員進入無菌室應關掉紫外燈；

4.?人員進入無菌室要穿無菌衣、帽、口罩和專用鞋，非工作人員不得隨意進入；

5.?無菌室應備有工作濃度的消毒液，如5％的甲酚溶液，70％的酒精，0.1％的新潔爾滅溶液等。 

6.?無菌室內配備紫外燈進行空氣消毒，應定期用適宜的消毒液（70%酒精或0.2%新潔爾滅）滅菌清潔，以保證無菌室的潔凈度符合要求。

7.?無菌室應保持清潔，嚴禁堆放雜物，以防污染。每日進行濕式小掃除，每周進行大掃除，每月進行空氣和實驗臺表面的細菌學檢測，各項指標控制在最低標準，符合無菌室的技術要求。 

8.?嚴防一切滅菌器材和培養基污染，已污染者應停止使用。

9.?需要帶入無菌室使用的儀器、器械、平皿等一切物品，均應包扎嚴密，并應用適宜的方法滅菌。 

10.?供試品在檢查前，應保持外包裝完整，不得開啟，以防污染。檢查前，用70％的酒精棉消毒外表面。 

11.?無菌間內應保持清潔。操作完畢，應及時清理無菌室，用2%-3%煤酚皂溶液消毒，擦拭工作臺面，不得存放與實驗無關的物品。再用紫外燈輻照滅菌。需30W紫外燈，距離在 1.0m處，照射時間不少于30min，使用紫外燈，應注意不得直接在紫外線下操作，以免引起損傷，燈管每隔兩周需用酒精棉球輕輕擦拭，除去上面灰塵和油垢，以減少紫外線穿透的影響。 

12.?處理和接種食品標本時，進入無菌間操作，不得隨意出入，如需要傳遞物品，可通過小窗傳遞。

13.?無菌室應每月檢查菌落數。在超凈工作臺開啟的狀態下，取內徑90mm的無菌培養皿若干，無菌操作分別注入融化并冷卻至約45℃的營養瓊脂培養基約15ml，放至凝固后，倒置于30～36℃培養箱培養48小時，證明無菌后，取平板3～5個，分別放置工作位置的左中右等處，開蓋暴露30分鐘后，倒置于30～36℃培養箱培養48小時，取出檢查。100級潔凈區平板雜菌數平均不得超過1個菌落，10000級潔凈室平均不得超過3個菌落。如超過限度，應對無菌室進行徹底消毒，直至重復檢查合乎要求為止。 

無菌操作基本技術及要求

1.?實驗進行前，無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%的酒精擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風扇運轉10分鐘后，才開始實驗操作。

2.?每次操作只處理一株細胞株，且即使培養基相同亦不共享培養基，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以70%的酒精擦拭無菌操作抬面。操作間隔應讓無菌操作臺運轉10分鐘以上后，再進行下一個細胞株之操作。 

3.?.無菌操作工作區域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時放置，其它實驗用品用完即應移出，以利于氣流之流通。實驗用品以70%的酒精擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在抬面之中央無菌區域，勿在邊緣的非無菌區域操作。 

4.?小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約45°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。 

5.?工作人員應注意自身之安全，須穿戴實驗衣及手套后才進行實驗。對于來自人類或是病毒感染之細胞株應特別小心操作，并選擇適當等級之無菌操作臺(至少ClassII)。操作過程中，應避免引起氣溶膠類物質的產生，小心毒性藥品，例如DMSO及TPA等，并避免尖銳針頭之傷害等。 

6.?使用無菌瓶內的溶液時，不可將無菌敷料堵塞瓶口傾倒無菌溶液，或直接伸入溶液瓶內蘸取，以免污染剩余的溶液。 

7.?無菌包內物品不慎污染或無菌包浸濕，外界微生物可滲入包內，造成污染，需重新消毒。

8.?戴手套時應注意未戴手套的手不可觸及手套外面，而戴手套的手則不可觸及未戴手套的手或另一手套的里面。戴手套后如發現破裂，應立即更換。脫手套時，須將手套口翻轉膠下，不可用力強拉手套邊緣或手指部分，以免損壞。

9.?每次操作過程中，均應做陰性對照，以檢查無菌操作的可靠性。

10.?吸取菌液時，必須用吸耳球吸取，切勿直接用口接觸吸管。

11.?接種針每次使用前后，必須通過火焰灼燒滅菌，待冷卻后，方可接種培養物。

12.?帶有菌液的吸管，試管，培養皿等器皿應浸泡在盛有5%來蘇爾溶液的消毒桶內消毒，24小時后取出沖洗。 

13.?如有菌液灑在桌上或地上，應立即用5%石碳酸溶液或3％的來蘇爾傾覆在被污染處至少30分鐘，再做處理。工作衣帽等受到菌液污染時，應立即脫去，高壓蒸汽滅菌后洗滌。

14.?凡帶有活菌的物品，必須經消毒后，才能在水龍頭下沖洗，嚴禁污染下水道。